QCM-D技术是一种非常敏感的分析方法，为了收集高质量的数据，重要的是要仔细注意测量准备、设置和执行的整个过程。
为了更多地了解最佳实践程序，我采访了我的同事，珍妮Ringberg，QSense的技术产品经理。Jennie描述了QCM-D测量准备和执行的五个步骤。在这篇文章中，我分享了我学到的关于第二步-样品液体的制备。
要从数据质量和再现性方面充分利用QCM-D测量，有几个方面需要注意。测量的设置和执行可以分为五个步骤:
在一个以前的网站我们讲过，第一步-传感器准备。在这篇文章中，我们继续第二步，看看在样品液体制备的背景下要考虑什么。
说到样品液体的制备，有很多事情要考虑，珍妮说。首先，如果你打算使用任何一种新的溶液，你必须考虑与这种液体相关的任何安全法规。所以，请查看MSDS表。
你还需要考虑化学兼容性，并确保你计划在实验中使用的溶液与它将遇到的所有仪器部件兼容，珍妮继续说。仪器的一些部件，如o形圈和垫圈，以及泵管，在涉及化学兼容性时需要考虑。其余的流道非常耐化学腐蚀。有高抗o型圈，垫圈和油管可用，但你需要了解化学规格，并相应地改变，珍妮说。
Jennie说，另一个需要考虑的方面是永远不要使用旧的缓冲区和解决方案。准备好所有的解决方案，并使用新鲜的。那么，什么是“老”呢?这取决于解决方案。例如，如果你使用PBS缓冲液，细菌喜欢在其中生长。所以，对于这种溶液，它的保质期可能比其他细菌不喜欢生长的溶液要短。所以，确保缓冲液中没有任何东西生长，没有可见的颗粒等，珍妮说。
另一件可能真正影响您的测量结果的事情是，重要的是要了解和计划，即所谓的体积效应珍妮说。这是在更改块的属性时产生的效果。所以，举个例子，如果你在处理溶液，比如说缓冲液a，然后你换成缓冲液B，它的粘度和密度完全不同，然后你会看到你的溶液有很大的变化f而且D曲线。现在，如果你把样本加入到buffer B中，那么你可以把这种位移解释为有东西被吸收到表面，而实际上它只是一个大位移。她说，当你设计实验时需要考虑这种影响，你需要计划如何制备溶剂和样品。
现在，在某些情况下，你可能需要使用不同的缓冲液或不同的溶剂，珍妮继续说道。然后，我的第一个建议是，从缓冲区a中的基线开始，如果可能的话，将样本添加到缓冲区a中，然后再次使用缓冲区a冲洗。然后如果你需要转换，你可以在这个冲洗步骤之后，从A到B，这将产生散装效果，然后从那里继续，这样你就不会从吸附步骤直接到缓冲B。
另一种方法是做一个缓冲序列，或溶剂序列，在测量的开始，只有裸露的表面。珍妮解释说，这样你就会知道大轮班是什么，你也会有一个参考，一些与之相关的东西。
另一个需要考虑的重要方面是防止测量过程中不必要的温度变化，因为这将对信号产生重大影响，Jennie继续说道。为了防止测量中的温度变化和温度引起的伪影，您应该平衡所有溶剂和样品的温度。例如，如果您将缓冲液或溶液存放在冰箱中，并直接从冰箱中使用，它可能会比仪器设定的温度T低得多集．在这种情况下，你引入的温度变化可能会导致QCM-D信号的巨大变化。为了避免这种情况，你应该总是让你的溶液平衡到尽可能接近仪器设定的温度，珍妮强调。
此外，确保不要在仪器中加热溶液，她继续说道。如果你在仪器内部加热溶液，就会产生气泡。正如我们所说，泡沫意味着麻烦。从这个角度看，溶液温度略高于T更好集然后在仪器中冷却溶液。
珍妮说，另一件需要考虑的事情是粒子的存在。颗粒在测量中不能很好地工作，所以如果您的溶液中确实有颗粒，如聚集体等，而您不感兴趣分析，您可以例如过滤或离心样品以去除它们。
珍妮说，另一件要考虑的事情是你的解决方案的稳定性。例如，如果你处理的是蛋白质，它们往往会降解。特别是当你提高温度的时候。如果你有来自天然蛋白质的测量结果，然后你将结果与来自蛋白质变性、降解或聚集的样本的结果进行比较，结果将非常不同。或者，如果你无意中混合了天然蛋白质和降解蛋白质，并将这些结果与使用天然蛋白质的结果进行比较，即使你认为你有相同的样本，结果也可能非常不同。
珍妮说，保持样品的相同状态很重要。她说，你应该使用每次都经过相同处理的新溶液，这样你就不会在开始测量时等了一周，然后再进行第二次测量，因为这样就不会考虑相同的样本了。
珍妮说，谈到蛋白质，如果你正在研究蛋白质和大分子，你不能指望它们在所有浓度下都以相同的方式与表面相互作用或结合，知道这一点可能会很好。有时它们的表现会因样品浓度的不同而不同。所以，在计划实验时，样品浓度也是很重要的考虑因素。
那么什么是好的浓度呢?珍妮继续说，很难给出一个普遍的答案，因为这取决于样本的类型。如果浓度太低，你可能根本看不到信号。如果你看这个过程的动力学，可能会很慢。但另一方面，如果浓度过高，表面的相互作用，如吸附，可能会被体移所掩盖。所以，介于两者之间是最理想的，她说。
珍妮总结说，这些是制备液体样品时要考虑的关键方面。
听下面的采访珍妮了解更多关于传感器准备中需要考虑的方面和避免的陷阱，以及QCM-D测量准备、设置和执行中涉及的其他四个步骤，以收集高质量的数据。
